Донской музей был открыт в центре Новочеркасска, в специально для него построенном двухэтажном каменном здании в стиле классицизм 1899 года. Но фактически музей намного старше, так как его коллекции уже экспонировались в 80-х годах XIX века в Древлехранилище при Войсковом правлении в Новочеркасске.
В феврале 41-го года прошлого столетия музей получил название «Музей истории Донского казачества».
Ныне в музее экспонируются интереснейшие коллекции из 150 тысяч единиц основного фонда: «Войсковых казачьих клейнодов и войсковых и полковых знамен XVIII-XIX веков», «Казачьего военного и бытового костюма XIX- начала XX веков», «Наградного, жалованного оружия, а также холодного и огнестрельного оружия», «Жалованных грамот, документов войсковой канцелярии и станичных правлений».
Здесь собрана обширная коллекция живописи: донской парсунный портрет конца XVIII - начала XIX веков, портреты наказных атаманов Войска Донского, военный казачий портрет, коллекции работ художников-передвижников, императорского портрета и коллекции западноевропейской живописи.
Современный музей Донского казачества представляет собой целый комплекс, состоящий из основных экспозиционных помещений и помещений нескольких филиалов: Атаманский дворец, мемориальные дома-музеи М.Б. Грекова, И.И. Крылова, В. Калмыкова и выставочный зал по улице Буденновской.
